PUVA诱导HL-60、NB4细胞凋亡时对Fas、FasL表达的影响
陈楠楠 向 阳 黄世林 张 励 张德杰
中国人民解放军第210医院中医血液科(辽宁大连 116021)
摘要:
目的探讨补骨脂索(PSO)加长波紫外线(UVA)光化学疗法(PUVA)诱导人白m病细胞HI 一60、NB4凋亡时对Fas、FasL表达的影响。方法 以HI 一60、NB4细胞为研究对象,以细胞捌亡牢、电镜下细胞超微结卡句政变以及细胞Fas、FasL在基冈、蛋白水平的表达为检测指标,观察中药补骨脂中提取的PS() 波长为360 nm的UVA对人白血病细胞诱导捌亡的作用以及部分作用途 ,并采 Ffj多因素方差分析法进行统汁 处 。结果PSO、UVA照射及PUVA均可诱导HL一60、NB4细胞发生捌亡,PUVA的作用显著强于前献j 。电镜F观察经PUVA处理后的HL一60、NB4细胞超微结构,可见H』J显的捌亡形态学改变 PSO、UVA照射及PUVA均可上渊HL一60、NB4细胞Fas在基 、蛋白水平的表达,下调Fasl 在基 、蛋白水平的表达,PUVA的作ff1显著强于前 者..结论PUVA可诱导白血病细胞HI 一60、NB4发生凋亡,作用强于PSO及UVA照射。PUVA诱导Hl 一60、NB4 亡的途径之一为 调细胞Fas基因表达水平,下调FasI 基因表达水平.. 床儿科杂志,2008,26(11):946-9491
关键词: PUVA; 白血病; HI一一60细胞; NB4细胞; 凋亡; Fas; FasI
中图分类号: R73 文献标识码: A 文章编号: 1000—3606(2008)ll一0946—04
补骨脂素(psoralen,PSO)是中药补骨脂种子中的主要成分,研究表明其具有光敏性质与抗肿瘤活性。本实验由纯中药补骨脂中提取出PSO,以不同浓度PSO加波长为360 nm、不同照射时间的长波紫外线(ultraviolet A, UVA)光化学疗法(PUVA)作用于HL一60、NB4细胞,通过流式细胞仪检测HL一60、NB4细胞住PUVA后的凋亡情况;电镜下观察细胞超微结构改变;荧光定最PCR及流式细胞技术检测Fas、Fast 基因、蛋白水平的表达情况,以探讨PUVA法对HL一60、NB4细胞诱导捌亡的作用及部分作用途径.
PSO具有抗肿瘤、抗白血病的作用,同时又具有光敏活性_】 ,波长范围在320~360 nm之间的紫外光照射,可激发补骨脂素的动力效应,从而增强其抗肿瘤及抗白血病的作用。本实验采用紫外波长为360 nm 的GLY一10型光量子血液平衡治疗仪和(或)纯中药补骨脂中提取的PSO对实验组进行处理,对细胞凋亡率、电镜下超微结构改变进行检测、分析,证实PUVA法对人急性非淋巴细胞白血病M2型HL一60细胞、人急性非淋巴细胞白血病M3型NB4细胞有明显的诱导凋亡的作用,说明诱导白血病细胞凋亡是PUVA法杀伤人类白血病细胞的途径之一。多因素方差分析结果显示,PUVA可诱导HL一60、NB4白血病细胞发生凋亡,与对照组相比,不同浓度的PSO与不同照射时间的UVA对HL一60、NB4白血病细胞株的凋亡率有明显差异,细胞的凋亡率随着PSO浓度的增加、UVA
照射时间的延长而增加
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