长波紫外线照射对培养人表皮黑素细胞与真皮成纤维细胞抗氧化活性影响 汪蓉瑛,史赢,贾海燕,雷铁池 (武汉大学人民医院,武汉430060) 摘要:目的对比观察了长波紫外线(uvA)照射对培养人表皮黑素细胞与真皮成纤维细胞过氧化氢酶(CAT)蛋白表达以及DNA氧化产物8一羟基一脱氧鸟苷(8-OXO—dG)生成的影响,旨在认识除生成黑素以外黑素细胞具有的抗氧化机制。方法建立人成纤维细胞及人黑素细胞原代和传代培养。培养细胞给予不同剂量(0,3,5,25 J/cm2)UVA照射,孵育3 h后,用间接免疫荧光的方法检测CAT和8-oxo—dG的水平。结果3 J/cm2 UVA照射后,成纤维细胞CAT蛋白表达与假照射组对比明显增加(P<0.001),8-oxo—dG荧光强度差别无统计学意义(肚O.918);黑素细胞中CAT蛋白表达与假照射组对比明显减少(P<0.001),8-oxo—dG荧光强度显著增加(p生0.002)。结论表皮黑素细胞对氧化应激存在固有的敏感性,且暴露UVA介导的氧化应激后黑素细胞缺乏适应性上调CAT表达,这些机制可能关系到白癜风皮损黑素细胞氧化损伤的发生。 关键词:黑素细胞;成纤维细胞;UVA;过氧化氢酶;DNA氧化损伤 中图分类号:R758.63 文献标识码:A 文章编号:1672—0709(2013)06—0345—04 皮肤细胞暴露UVA后细胞内产生大量过氧化氢(H:O:)。CAT被认为是最主要分解H20:的抗氧化酶,能快速清除H:O:使其不进一步产生毒性更强
的羟自由基,对细胞呈现光保护m。同时,UVA照射又可耗竭细胞内的CAT,故此有人把细胞中CAT含量视作急性和慢性氧化应激的标记【11l。本研究比较分析了不同剂量UVA照射对两种皮肤细胞CAT蛋白水平以及UVA诱导DNA氧化损伤产物8--OXO—dG的影响,结果显示3 J/cmz UVA照射后,成纤维
细胞中CAT蛋白表达明显增加,DNA氧化产物8一OXO—dG水平较低;而黑素细胞中CAT蛋白表达低,DNA氧化产物8-oxo—dG增多。25 J/cm2 UVA照射后,成纤维细胞中高表达的CAT又减低,而此剂量照射下大多数黑素细胞脱壁死亡。提示黑素细胞抗氧化活性较成纤维细胞低,且缺乏氧化应激介导的CAT蛋白适应性上调。
总之,与真皮成纤维细胞相比表皮黑素细胞自身对氧化应激存在固有的敏感性,且暴露UVA介导的氧化应激后缺乏适应性上调CAT的表达。这些机制可能关系到白癜风皮损黑素细胞氧化损伤的发生。通过上调CAT表达,增强黑素细胞对氧化应激的抵抗,可能是今后治疗白癜风等脱色素皮肤病新的治疗靶点。
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