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PUVA诱导K562细胞凋亡时对Fas表达的影响 张励，陈楠楠，刘小宇，王伟，黄世林(解放军第210医院 中医血液科，辽宁大连116021)
摘要：
目的探讨补骨脂素(PSO)加长波紫外线(UVA)光化学疗法(PUVA)诱导人白血病细胞K562凋亡时对Fas表达的影响。方法以K562细胞为研究对象，以细胞凋亡率、电镜下细胞超微结构改变以及细胞Fas基因表达水平、蛋白表达水平为检测指标，观察中药补骨脂中提取的PSO加波长为360 nm的UVA对人白血病细胞诱导凋亡的作用以及部分作用途径，并采用多因素方差分析法进行统计学处理。结果(1)单纯PSO、单纯UVA照射及PUVA均可诱导K562细胞发生凋亡，PUVA的作用显著强于前两者。(2)电镜下观察经PUVA处理后的K562细胞超微结构，可见明显的凋亡形态学改变。(3)单纯PSO、单纯UVA照射及PUVA均可上调K562细胞Fas基因表达水平，PUVA的作用显著强于前两者。(4)单纯PSO、单纯UVA照射及PUVA均可上调K562细胞Fas蛋白表达水平，PUVA的作用显著强于前两者。结论(1)PUVA可诱导白血病细胞K562发生凋亡，作用强于单纯PSO及单纯UVA照射。(2)PUVA诱导K562凋亡的途径之一为上调K562细胞Fas基因表达水平。
关键词：补骨脂素；长波紫外线；白血病；K562细胞；凋亡；Fas
中图分类号：R 733．7 R 454．2 文献标志码：A 文章编号：1671-3826(2008)02-0163-03
补骨脂素(psoralen，PSO)具有抗肿瘤、抗白血病的作用，同时又具有光敏活性 j，波长范围在320～360 nm之间的紫外光照射，可激发补骨脂素的动力效应，从而增强其抗肿瘤及抗白血病的作用。本实验由纯中药补骨脂中提取出PSO，以不同浓度加波长为360 nm、不同照射时间的长波紫外线(ultraviolet A，UVA)光照作用于K562细胞，通过流式细胞仪检测K562细胞株在补骨脂素加长波紫外线的光化学疗法(PUVA)后的凋亡情况；电镜下观察细胞超微结构改变，荧光定量PCR及流式细胞技术检测Fas基因、蛋白水平的表达情况，以探讨PUVA诱导K562细胞株凋亡的作用及部分作用途径。
PSO是中药补骨脂种子中的主要成分，研究表明其具有光敏性质与抗肿瘤活性。当被365 nm 波长激发后能与细胞内DNA双链形成交联并释放单态氧等活性物质，使其抗肿瘤活性得到显著增强。本实验采用紫外波长为360nm 的GLY一10型光量子血液平衡治疗仪和(或)纯中药补骨脂中提取的PSO对实验组进行处理，对细胞凋亡率、电镜下超微结构改变进行检测、分析，证实PUVA对人红白血病K562细胞株有明显的诱导凋亡的作用，可以说明诱导白血病细胞凋亡是：PUVA杀伤人类白血病细胞的途径之一。多因素方差分析结果显示，PUVA可诱导K562白血病细胞株发生凋亡，与对照组(0 min 0 mg／L)相比，不同浓度
的PSO与不同照射时间的UVA对K562白血病细胞株的凋亡率有明显差异，K562细胞的凋亡率随着PSO浓度的增加，UVA照射时间的延长而增加。
  
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